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支原體DNA抽提Kit被污染后有哪些表現
點擊次數:152 發布時間:2022-10-26
支原體DNA抽提Kit特點及操作步驟  
特點  
1.符合歐洲藥典的要求。  
2.從細胞上清和生物制品中,均可分離支原體DNA,全程只需30分鐘。  
3.洗脫DNA純度高,體積50μl,保證PCR最大的靈敏。  
細胞被支原體污染后的表現  
①細胞生長緩慢  
②細胞變形  
③培養基中碎片增加  
④細胞易聚團  
⑤鏡下觀察有小黑點  
⑥培養基提前變色  
操作步驟  
試劑盒組分  
Spin columns(核酸純化?。?、Collection tubes(收集管)、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液
該試劑盒的設計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本(如軟骨細胞、血清、細胞培養上清)在DNA抽提后的檢測標準??芍苯訖z測細胞上清(研究領域),或者先對細胞培養物富集,或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。
檢測原理:
該試劑盒擴增柔膜體對應的16S rRNA上的特異序列, 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。
試劑盒說明書同時包括細胞培養上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程,包括對DNA抽提和對樣本體積的規定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養法不同的是,無須活支原體。和一些生化和細胞學方法相比,PCR具有更高的靈敏度和準確性。
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