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支原體DNA抽提Kit的操作方法
點擊次數:148 發布時間:2022-10-25
  支原體DNA抽提Kit有如下幾種情況。如細胞培養液中存在抑制PCR的物質,這時就需要提取。細胞培養基中的血清濃度如果超過12%,那么對下游的PCR反應會產生抑制。酚紅,對熒光定量PCR的檢測也會干擾。這些均可以通過使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來克服。對于樣品類型是細胞團、疫苗、凍存細胞和石蠟包埋的組織,也需要提前提取DNA。另外,如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml,則先需要用蛋白酶K進行處理。
  支原體DNA抽提Kit與細胞培養高度重合的培養條件,注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。
  早有研究表明,一些支原體(包括最為常見的人型支原體、發酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當這些支原體混入細胞培養體系后,會與細胞爭搶精氨酸,導致細胞「吃不飽飯」,出現營養不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。
  如果你培養的細胞出現以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測試劑(檢測神器幫你揪出培養基中的支原體?。┻M一步確認。
  支原體DNA抽提Kit細胞被支原體污染后的表現
  1.細胞生長緩慢
  2.細胞變形
  3.培養基中碎片增加
  4.細胞易聚團
  5.鏡下觀察有小黑點
  6.培養基提前變色
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